飞机设计手册 微盘:什么是“四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)”?

来源:百度文库 编辑:高校问答 时间:2024/05/01 15:30:45

“四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)”,即四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法。MTT是一种噻唑盐,化学名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液为黄橙色。小鼠脾细胞受到ConA作用后发生增殖活化,其胞内线粒体琥珀酸脱氢酶活性相应升高,MTT作为其底物参与反应,形成蓝色的甲臜(Formazan)颗粒沉积于细胞内或细胞周围,经盐酸—异丙醇溶解后为蓝色溶液,可用酶标测定仪测定细胞培养物的OD值,测定波长570nm。根据OD值的大小计算反应体系中细胞增殖程度。
目前MTT法常用于以下几个方面的研究:
1、检测细胞活性:常作为细胞毒性试验的一种方法。
2、体外药物敏感实验:该方法简便、经济、快速,重复性好,所需的细胞数较少,目前广泛的用于临床前的抗癌药物的筛选研究。
3、一些细胞因子活性的研究。

MTT法即四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法。MTT是一种噻唑盐,化学名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液为黄橙色。小鼠脾细胞受到ConA作用后发生增殖活化,其胞内线粒体琥珀酸脱氢酶活性相应升高,MTT作为其底物参与反应,形成蓝色的甲臜(Formazan)颗粒沉积于细胞内或细胞周围,经盐酸—异丙醇溶解后为蓝色溶液,可用酶标测定仪测定细胞培养物的OD值,测定波长570nm。根据OD值的大小计算反应体系中细胞增殖程度。

四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)的基本原理是活细胞的线粒体脱氢酶能将染料MTT转变为不溶的紫色甲瓒(formazan)颗粒,后者的生成量与细胞数目和/或细胞活性呈正相关,用二甲亚砜(DMSO)溶解所生成的甲瓒,通过检测光密度值变化,可间接反映细胞生长及增殖活性