钢丝绳手动绞盘视频:体外消化实验

定义
从动物的胶原质中，通过部分酸法水解(A型)，
或者部分碱法水解(B型)，
甚至还可以通过酶解，提纯而获得的胶原蛋白。

*明胶的成分
蛋白质：85 to 90％
油脂含量：≤0.1％
灰分：0.5-1％
含有人体所需的二十一种氨基酸中的二十种

体外消化法
ppp 体外消化法主要是以商品酶或试验鱼的粗酶提取液作为消化酶，模拟鱼体消化环境进行体外消化。虽然体外消化法不能反应体内的真实消化情况，但其测定值与体内测定值有一定的相关性，而且操作简便、 快速、成本低，对确定日粮配方提供极其有用的参考。
1.1 常规酶解法
ppp 常规的体外酶消化方法为二步酶解：先将试验饲料在pH=2的胃蛋白酶缓冲液中酶解2h后转移到pH=8的蛋白复合酶的缓冲液中继续振摇酶解24h，再加入10%的三氯醋酸沉淀未被酶解的蛋白及多肽，离心或过滤得到的残渣即为不被消化物[1，2]。
ppp 干物质表观消化率（%）=(样品重-残渣重)/样品重×100%
ppp 蛋白消化率（%）=(样品蛋白总重-残渣蛋白总量)/样品蛋白总量×100%
1.2 透析法
ppp 由于在传统的封闭体系内进行体外消化过程中，随消化时间的延长，消化产物不断积累，对酶解产生抑制作用，而透析法则克服了产物的抑制作用，透析膜的透析作用模拟了小肠的吸收作用。黄瑞林等（1999）[3]试验证实随着透析液的增加粗蛋白的消化率升高，且用此法测得的体外表观消化率与体内消化率的相关系数为0.999，席鹏彬等（2003）也证实，用体外透析法测得菜粕蛋白体外消化率与体内表观消化率显著相关[4]。
1.3 pH值测定法
ppp 由于蛋白在水解过程中肽键断裂释放质子，因此可利用pH变化测定蛋白水解程度。pH值测定技术分为两种，pH下降法(pH drop)及pH恒定法（pH stat）。pH下降法是将底物与酶混合物在pH=8的环境下酶解10min后测定pH的下降[5]。
蛋白相对消化率（%）=待测样品反应体系pH的下降值/酪蛋白反应体系pH下降值×100%
恒pH法克服了由于pH下降而导致的酶活性降低的缺点，它利用全能电位滴定仪随酶反应体系pH的变化不断向反应体系中滴加0.1M的NaOH，保持体系pH不变，根据滴定所用的NaOH的体积计算样品蛋白水解率[6]。
ppp 蛋白水解率（%）=[（B×Nb×1.5/M×（S%/100））/8]
ppppppppppppppppppppppppppp ×100%
式中：B ——NaOH滴定体积（ml）；
ppppp Nb ——NaOH浓度；
ppppp M ——样品质量（g）；
ppppp S ——样品蛋白含量。
ppp 体外消化法操作简便，适用于对商品原料及饲料营养价值的评定，尤其是pH测定法，不仅简便快速，与体内消化的相关性也在0.7～0.9之间[5，7]。但是，体外消化法也存在一些不足，首先体外的消化环境与鱼体的环境有较大的差异，其次所用的体外消化酶特异性与鱼肠道酶存在差异，这导致体外测定值可靠性差。