星海领主h:亚硒酸钠能消除加速人体衰老的活性氧吗?

亚硒酸钠对氧自由基的影响

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　　时间：2005-5-11 10:54:52 来源：右江民族医学院产学研网 阅读212次

　　实验方案

　　1、研究目标、研究内容和拟解决的关键问题
　　研究目标：亚硒酸钠能够在体外独立清除氧自由基。
　　研究内容：配置各种所需溶液，然后根据实验方案的步骤进行实验，把每
　　次实验的数据加起来取平均值，根据结果进行讨论分析亚硒酸钠能否在体外独立清除氧自由基。
　　拟解决的关键问题：所需药品的购买，溶液配置的准确度，以及测定的精确度。
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　　2、拟采取的研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析
　　研究方法：比色法测定
　　技术路线：配置溶液——取样——样品处理——测定——结果处理及分析
　　实验方案：1.配置溶液
　　1 A液 1mol/L Hcl 48ml
　　Tris 36.6g
　　TEMED 0.23ml
　　2 B液 过硫酸铵 0.14g→加水到100ml
　　3 α -奈胺0.1g→加75％乙醇50ml溶解→加水到100ml
　　4 盐酸羟胺 0.069g→加水到100ml
　　5 对氨氢苯磺酸0.294g→加水到100ml(加热)
　　6 亚硒酸纳（0.225mg/ml） 22.5mg→加水到100ml
　　7 维生素C （1mg/ml） 10mg→加水到10ml
　　2.取样，样品处理及测定，操作如下：
　　维生素C 亚硒酸钠 标准管 空白管 （单位：ml）
　　样品 1 1 - -
　　蒸馏水 - - 1 1
　　A液 0.4 0.4 0.4 0.4
　　B液 1.6 1.6 1.6 __
　　蒸馏水 — — — 1.6
　　混匀，室温静置3分钟
　　盐酸羟胺 0.4 0.4 0.4 0.4
　　混匀，30摄氏度水浴20分钟
　　α—奈胺 1 1 1 1
　　对氨氢苯磺酸 1 1 1 1
　　混匀，30摄氏度水浴25分钟
　　正丁醇（抽提）4 4 4 4
　　倒转6次，静置20分钟，取上层液，离心2000rPm,5分钟，A530
　　3．根据所得的A，计算出O 的浓度=Ax50，清除率=C标—C测/C标x100％。
　　4．可行性分析：此实验方案已有前人做过，因此开展本课题研究是可行的。

　　亚硒酸钠对氧自由基的影响的综述

　　随着自由基医学和自由基生物学的发展，人们认识到，自由基是带有未成对电子的分子或离子，具有很高的反应活性。它可对机体产生毒害，破坏生物大分子，影响细胞活性，主要损害细胞包括血管内皮细胞膜及亚微结构，并引起一系列有害的生化反应。现已明确自由基与许多病理生理现象都有密切的关系，如衰老、肿瘤、炎症、突变、心脑缺血、动脉粥样硬化、帕金森病等，因此致使抗自由基生物学、医药学与日用化学品科学的研究成为一个十分活跃的研究领域。
　　氧自由基具有很多种形式，其中最重要的、与人关系最密切的自由基有O2- 和 ，O2- 体内形成最早，它通过歧化反应或Fenton反应可生成 ， 对细胞的破坏作用最强，它同时也是脂质过氧化的引发剂。氧自由基代谢在机体内的生成和去向处于平衡状态。有些氧代谢的产物对机体是有利的，而当机体的自由基去除能力减弱或自由基去除剂供给不足，以及食入生成自由基的物质过多时，体内的自由基将过剩，造成组织损伤，组织损伤主要是指脂质过氧化引起的损伤，人体内不断产生自由基，但并未对身体造成严重后果，原因是体内同时存在着有清除自由基的酶系统和有效的小分子清除剂，二者保持相对平衡，随着年龄的增长，自由基清除剂的含量和活性降低，而天然的活性小分子或抗衰老的天然药物能清除自由基，起到延缓皮肤衰老、延缓组织器官衰老、延长寿命和逆转衰老等作用。
　　硒是构成亚硒酸钠的主要成分。亚硒酸纳是重要的亚硒酸盐，它具有重要的抗癌、抗糖尿病、抗氧化、保护机体免受活性氧自由基损伤等生物功能。本次实验主要是看亚硒酸钠对氧自由基的清除能力如何，目的在与证明硒元素在体内外均可以清除自由基。
　　有关测定抗氧化物对自由基清除率的方法很多，目前文献中介绍的方法主要有电子自旋共振法、化学发光法、高效液相普法和化学分光光度法等，前三中由于仪器特殊或实际昂贵，不能得到广泛应用，因此我们采用化学分光光度法来检测自由基清除率，在亚硒酸钠中加入产生氧自由基的体系的溶液，染有用比色法测定，计算氧自由基清除率。
　　参考文献：
　　1．萧华山等，一种用分光光度计检测氧自由基的新方法。生物化学与生物物理进展 1999.26(2) 180-181.
　　2.宋怀恩等，抗氧化剂筛选方法的研究进展。中国药物化学与杂志 2003.13(2) 119.
　　3．孙恩杰等，硒的剂量Weinderg原理的自由基机制。微量元素与健康研究 1997。14（2）7-8
　　4．张云峰等，比色法测定发酵前、后胡萝卜汁对氧自由基的清除作用。中国科学院新疆化学研究所。

　　实验人员：张树球导师四组

　　覃雪梅（组长）02－8 吴婉艳 02－8
　　潘俏璎 02－8 王春云 02－8
　　陈秀桔 02－8 邓海林 02－8

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