高校问答远藤实 冬恋日语原唱:什么是T-A克隆，那位高手知道帮帮忙吧！！！
来源：百度文库 编辑：高校问答 时间：2024/05/07 08:20:44
TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）
利用Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能，在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。Invitrogen公司TA克隆系统和Topo TA克隆系统都提供一个线性含3`-T突出端的载体用于直接高效地连接PCR产物。系统中也包含感受态细胞和S.O.C培养基, 使得实验操作更为简单方便。
所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物，不需将PCR产物进行优化，不需把PCR产物做平端处理（Invitrogen另有平端载体供高确限度酶克隆）。不需在PCR扩增产物上加接头，即可直接进行克隆
T-A克隆载体
pSK-T vector是一种高效克隆PCR产物的专用载体，由pBluescript II SK(+)改造而成。在它两侧的3`端，具有突出的碱基“T”，可以和PCR产物3`末端的“A”碱基互补，从而大大提高PCR产物的连接、克隆效率。本产品以常用的pBluescript II SK(+)为基础研制而成，具有同pBluescript II SK(+)完全相同的功能，可通过α互补的颜色反应来筛选重组子。另外，在载体的两端分别增加了一个Hind III位点，便于重组子的酶切鉴定。
提取细胞复制克隆